標準マウスモノクローナル抗体生産サービス
標準マウスモノクローナル抗体作製サービスの特色
マウスモノクローナル抗体は、単一のエピトープ、高特異性、安定した継代、大規模な反復産生などの特徴を有するため、基礎研究、医学診断、腫瘍療法および放射免疫イメージングなど多くの領域において広く応用されている。Sino Biologicalが開発したマウスモノクローナル抗体は、高い感度および高特異性の利点を有する。また、顧客の要求に応じた柔軟なカスタマイズソリューションを提供し、顧客に高品質の抗体を提供することを目指している。
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標準マウスモノクローナル抗体作製サービスのプロセス
| サービスの手順 | 具体的な内容 | 周期 | 納品物 | 引き渡しの標準 | 価格 |
|---|---|---|---|---|---|
| ① 抗原作製見積もりをもらう |
抗原作製サービスをご参照ください | ||||
| ② 抗原検証 |
• UVおよびSDS-PAGE解析 | 1-2日 | •2-5株のELISA陽性クローン （2チューブの凍結保存細胞） •クローンあたり2〜5 mLの上清 •精製抗体1〜3mg（1株のハイブリドーマ細胞を選択する） •実験レポート |
ELISA検出では、精製抗体と免疫原と結合する。 | |
| ③ 免疫および血清力価試験 |
• 免疫前採血 • 五つのBalb/c マウス免疫 • 血清力価試験 • 最終採血 |
8-10週間 | |||
| ④ 融合とスクリーニング |
• 融合とスクリーニング • サブクローニングと細胞増幅 • 細胞ライブラリーの構築 |
4-6週間 | |||
| ⑤ 抗体の生産および精製 |
• 適切な規模のハイブリドーマ細胞培養 • プロテインAアフィニティークロマトグラフィーによる精製 |
2-3週間 | |||
| ⑥ QC解析 |
• SDS-PAGEおよびUV解析 • ELISA検証 |
3日 | |||
顧客が抗原を提供する場合は、次の要件がある：
| タンパク質抗原 | ペプチド抗原 | ||
|---|---|---|---|
| 抗原量 | 3-4mg/5 mice | • KLH/VLPカプリングペプチド | 5mg/5 mice |
| 分子量 | >10kD | 濃度 | >0.5mg/mL |
| SDS-Page純度 | >90% | • OVA/Biotin 標識ペプチド | 2-3mg |
| 濃度 | >0.5mg/mL | 濃度 | >0.1mg/mL |
| 処方 | PBS。PBSではない場合、お問い合わせください | 処方 | PBS。PBSではない場合、お問い合わせください |
標準マウスモノクローナル抗体作製サービスのケース研究
Sino Biological Inc.はハイスループットマウスモノクローナル抗体作製プラットフォームを確立し、免疫化プロトコール、融合プロトコール、スクリーニングプロトコール、およびハイスループット抗体作製と精製プロトコールの最適化を通して、マウスモノクローナル抗体のためのハイスループット開発プロトコールの完全なセットを確立した。マウスモノクローナル抗体は、ELISA、WB、IHC、FACSおよび他のプラットフォーム、ならびに複数の細胞と複数の組織によって検証済です。
a) 複数の組織および複数の細胞によって検証済
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• Human placenta 
Fig 1. Immunochemical staining of human target D with mouse Mab. The left panel: tissue incubated with primary antibody; The right panel: tissue incubated with the mixture of primary antibody and antigen. -
• Human breast carcinoma 
Fig 2. Immunochemical staining of human target D with mouse monoclonal antibody.
b) 複数のアプリケーションによって検証済
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Fig 1. Confocal immunofluorescence analysis of human target D in MCF7 cells. Positive staining was localized to lysosome membrane.
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Fig 2. Flow cytometric analysis of human target D on Jurkat cells. The histogram were derived from gated events with the forward and side light-scatter characteristics of intact cells. -
Fig 3. Lane A: Jurkat Whole Cell Lysate. Anti-target D mouse Mab; goat Anti-mouse IgG H&L (Dylight800).
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Fig 4. Lane A: Hela Whole Cell Lysate; Lane B: Jurkat Whole Cell Lysate; Lane C: Daudi Whole Cell Lysate. Anti-target D mouse Mab; Dylight 800-labeled antibody to Mouse IgG (H+L).
標準マウスモノクローナル抗体作製サービスのメリット
- 専門的な組換えタンパク質の発現と精製技術、複数のタンパク質発現および精製プラットフォーム、約6000種のタンパク質生産に関する豊かな経験、抗原発現の高い成功率
- プロなペプチド設計ソフトウェア、高効率的な結合方案により、設計されたペプチドの免疫成功率が95％以上であることを確保
- お客様の最終的なアプリケーション要件に応じたカスタマイズ免疫、スクリーニング、検出サービスが提供可能
- ELISA、WB、IHC、FACSおよび他の検証プラットフォーム、複数細胞および複数組織検証により、バックグラウンドが低く高感度な抗体のスクリーニング成功率を向上させる
- ステップごとに見積もりすることと節点による課金により、顧客のリスクを全面的に削減し、コストを節約
- 最適化された電気融合技術は、PEG媒介細胞融合より3〜5倍高い効率を持つ
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