免疫沈降/IP-SH-SY5Y細胞ライセート

免疫沈降は、沈降可能なマトリックスに付着した特異的抗体に結合することによって抗原を単離する技術である。また、ゲル濾過や密度勾配沈降などの他の技術によって分離されたタンパク質分画を分析するためにも使用される。免疫沈降のための抗原の供給源は、非標識細胞または組織、代謝的または内在的に標識された細胞、またはインビトロ翻訳タンパク質であり得る。このユニットでは、種々の手段によって溶解された懸濁細胞または接着細胞を用いた広範囲の免疫沈降技術が記載された。通常、プラズマ導入された細胞または天然細胞は、免疫沈降のための理想的な試料である。

SH-SY5Yは科学研究に用いられるヒト由来の細胞株である。神経芽細胞腫を有する4歳の女性患者の髄生検からSK-N-SHと呼ばれる元の細胞系を単離し、それをサブクローニングしたものである。SH-SY5Y細胞はニューロンの機能および分化のインビトロ研究モデルとしてよく使用される。それらは表現型においてアドレナリン作動性であるが、ドーパミン作動性マーカーも発現するため、パーキンソン病の研究にも使用されている。

SH-SY5Yはdopamine-β-hydroxylase活性を有し、グルタミン酸をGABAに変換することができる。また、約3〜4週間でヌードマウスに腫瘍を誘発する。ニューロン特性の喪失は、細胞継代の増加で説明されている。したがって、継代20代以降は使用しないでください。ノルアドレナリン摂取またはニューロン腫瘍マーカーなどの特定の特性を確認することにも使用しないでください。