フローサイトメトリー (FCM) /FACS | チューブとプレート

細胞は適切な遠心分離機を備えた任意の容器中で染色することができる。最終的にあなたのサイトメーターをうまくはめるテストチューブで染色することができるが、これらのチューブが大きな底部直径を有するため、少量の染色溶液で一貫した結果を得ることが困難である。エッペンドルフチューブは、その円錐形のために古典的なチューブだと見られる。エッペンドルフチューブ内で微量で染色を行い、その後、懸濁液を完全な1mlに希釈し、各洗浄工程に用いることができる。

複数のサンプルを染色し、プレートアダプターを備えた遠心分離機を使用する場合は、96ウェルの丸底マイクロタイタープレートを使用することが薦められる。洗浄工程における希釈倍率はこれらのプレートでは効果的ではないが(各ウェルの最大容量は200mlである)、器質化し、ラベルする必要がなく、数十本の試験管を操作することが可能であるため、プレート染色は非常に魅力的になる。ウェルを識別するためのテンプレートを複写する。試薬の追加を容易にするために、いくつかの考えを持ってプレート内のサンプルのレイアウトを計画してください。通常、細胞が調製されている間にウェルに抗体を予め添加して、細胞が準備ができるまでプレートを4℃の暗所で放置し、その後、マルチチャネルまたはrepeating pipetteを使用して、細胞懸濁液のアリコートをウェルの列に添加する。この手順で抗体を1つのウェルから次のウェルにドラッグしないように注意を払う必要が有る。プレートでの染色や遠心分離に自信を持つようになるまで少しの練習が必要であるが、ほとんどの人は非常に早く身に付ける。