フローサイトメトリー (FCM) /FACS 適用 |細胞周期

細胞周期は、細胞の複製において起こる一連の活動であり、その調節不全は、腫瘍形成につながる可能性がある。 したがって、細胞周期のモニタリングは、疾患の診断および治療の予後に関する多くの情報を提供することができる。

G0は、細胞が周期から去った、または分裂を止めている休止期です。細胞周期は、通常次の四つの区分に分けられる。

G1 期: RNA、リボソームおよびタンパク質が合成される。
S 期: DNAの複製がおこる。
G2 期: DNA合成と有糸分裂との間のギャップ期。
M 期: 細胞は2つの娘細胞に分裂される。

フローサイトメトリーを用いた検出法の原理

フローサイトメトリーを用いた、広く使用されている検出方法の原理は、異なる期のDNA量の違いである。G1、S、G2およびMにおける細胞の倍数はそれぞれ2N、2-4N、4Nおよび4Nである。しかしながら、DNA量が同一であるG0およびG1期、G2およびM期は、DNA量の違いに基づいて識別できない。

細胞周期を検出する他の方法も開発されている。一つはDNA量および増殖関連タンパク質の2変量解析に基づく方法である。例えば、サイクリンD、サイクリンE、サイクリンAまたはサイクリンB1の発現。このアプローチは、G0をG1細胞と区別すること、有糸分裂細胞を同定すること、または他の細胞内タンパク質の発現を細胞周期期に関連付けることができる。もう一つの方法はDNA複製細胞を標識するために組み入れられた5'-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU)の検出に依存する。