フローサイトメトリー (FCM) / FACS 抗体は、Fc受容体ブロッキングによって検証されます

Fc受容体は、免疫系の保護機能に寄与する免疫グロブリンスーパーファミリーに属するタンパク質である。Fc受容体は、Bリンパ球、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球およびマスト細胞を含む特定の細胞の表面上に見出される。Fc受容体の名称は、Fc部分として知られている抗体の一部に対する結合特異性に由来する。Fc受容体は、感染細胞または侵入病原体に付着した抗体に結合する。Fc受容体の活性は、貪食細胞または細胞傷害性細胞を刺激し、抗体媒介食作用または抗体依存性細胞媒介性細胞毒性によって微生物または感染細胞を破壊する。

認識する抗体に基づいていくつかの種類のFc受容体が存在する。 例えば、IgGと結合するFc受容体はFc gamma受容体(FcγR)と呼ばれ、IgEに結合するFc受容体はFc epsilon受容体(FcεR)と呼ばれ、IgAと結合するFc受容体はFc alpha受容体(FcαR)と呼ばれる。

Fcガンマ受容体(FcγR)は、IgGのFc部分の受容体である。全てのFcガンマ受容体(FcγR)は免疫グロブリンスーパーファミリーに属する。Fcガンマ受容体は、オプソニン化された食作用、炎症性メディエーターの放出および抗体依存性細胞傷害作用など、多くの免疫系エフェクター機能において不可欠である。

受容体の親和性によって、Fcγ受容体は高親和性受容体FcγRI(CD64)、低親和性受容体FcγRII(CD32)およびFcγRIII(CD16)という3つの主要なクラスに分けられる。この3つのクラスは高度に保存された細胞外Igドメインを含む。


ヒトIgG受容体の発現様式。+,発現を意味する; (+),誘導発現; ±,希な細胞の発現; −,発現しない; NA,解析されてない; Mono/Macro, 単球および/またはマクロファージ。 §ヒトDCサブタイプの特異的発現に関する、Guilliamsらのレビューをご参照ください。 ♮Fcgr2c-ORF 人において。 #非通常Fcgr2c-stop人の中における検出可能な機能的発現。

FcR ブロッキング

あなたの細胞の表面上に多くのFc受容体(特に単球、マクロファージ)を持っている場合、またはそれらが無血清培地で培養されている場合、細胞と同種の血清、抗FC受容体モノクローナル抗体または、組み換えFcタンパク質を細胞とともにプレインキュベーショすることによって、モノクローナル抗体のFC領域の非特異的結合をブロックすることは賢明なことである。
全血の染色の場合は、高濃度の血清が染色中に存在するので、これは必要ではありません。 しかし、あなたのサンプルに上記の細胞型を含む場合、サンプル染色の前にFc受容体ブロッキングを行うことを常にお薦めします。