ELISAトラブルシューティング

IHC、免疫沈降などの複雑なプロトコールがないが、ほとんどの免疫アッセイでこれらの問題が起こりうるため、ELISAアッセイでも多くの問題が起こりうる。この部分では、事前にリストされた問題を含む原因解決表の手段としてELISAのトラブルシューティングが提供される。個々のアッセイでは性能要件が異なるため、ここに記載されている条件はすべてのELISAキットには該当しないことに注意してください。仕様については、添付文書を確認してください。

(1) ELISAシグナルが異常に高く、標準曲線に飽和ODがある場合、考えられる原因と推奨されるトラブルシューティングは次のとおりです。

考えられる原因 推奨されるトラブルシューティング
標準液を再調製する量は要求されるものより少ない。 プロトコールで推奨される正しい量の溶液で凍結乾燥標準液を再調製する。
プレートのインキュベーション時間が長すぎた。 インキュベーション時間を減らす。
検出抗体のインキュベーション時間が長すぎた。 検出抗体のインキュベーション時間を減らす。
基質溶液のインキュベーション時間が長すぎた。 基質溶液のインキュベーション時間を減らす。

(2) サンプルの読み取り値が範囲外である場合、考えられる原因とトラブルシューティングは次のとおりです。

考えられる原因 推奨されるトラブルシューティング
サンプルには分析物がないか、または分析物が検出可能なレベル以下である。 サンプルが検出可能なレベル以下である場合、より高いサンプル量を使用してください。 適切なプロトコルの変更については、技術サポートに確認してください。
サンプルには、濃度が最高標準点を超えた分析物が含まれている。 サンプルの希釈および再分析が必要である。

下記のように、ELISAアッセイの最も一般的な問題点を列挙しています。クリックすると詳細が見られます。