ELISAコツ

洗浄

洗浄の目的は、結合したおよび結合していない(遊離/望ましくない)試薬/血清成分を分離することである。これには、試薬のマイクロウェルを空にした後、ウェルに液体を加えることが含まれる。このようなプロセスは、ウェル毎に少なくとも3〜6回実施される。等張性を維持するために、ウェルを洗浄するために使用される液体は、通常は緩衝される(PBS)ものである。その理由とは、ほとんどのAg-Ab反応がこのような条件下で最適である。水道水は組成(pH、モル濃度など)が大きく異なるため、お勧めしない。一般に、溶液でウェルを満たす機械的作用は、試薬と結合していないウェルを洗浄するのに十分である。一部の人は、各添加後に短時間(浸漬時間)洗浄液を残す(1〜5分間)。場合によっては、界面活性剤、特にTween-20(0.05%)を洗浄緩衝液に加える。これは、空気が閉じ込められ、洗浄液がウェル表面に接触することを防止するので、過度の泡立ちが生じて良くない洗浄状態を生じる問題を引き起こす可能性がある。ほとんどの場合、この添加は洗浄手順に大きく影響しない。洗剤を使用する場合、試薬に悪影響を及ぼさない(変性Ag)ように注意しなければならない。また、ウェル内の発泡を防ぐことにも十分注意してください。

通常の洗浄

手動でプレートを洗浄する場合、最も重要な要素は、各ウェルが洗浄液を受け取ることである。こうすると、気泡がウェルに閉じ込められないこと、または親指がコーナーウェルの上に置かれないことを可能にする。

ストリップ/プレートワッシャー

様々な洗浄サイクルをプログラムすることができる。特定のノズルが詰まるなどの機械エラーが発生しやすいため、注意深いメンテナンスが不可欠である。
さらなるELISAのコツについては、以下の点をお勧めする。