ほかのELISAコツ

基質の準備

新しく準備した基質Aと基質B(二つの試薬基質システムにおいて)を使用してください。
基質溶液を1時間以上保持しないようにしてください。
基質溶液の操作手順に従ってください。
色反応の速度に影響するため、溶液の温度は重要である。
古い基質を含む試薬ボトルに新しい基質を追加しないようにしてください。
H₂SO₄で古い基質溶液ボトルを洗浄し、蒸留水で十分にすすぐ。

コンジュゲート

推奨温度で保管してください。
後で使用するために過度に希釈したコンジュゲートを保管しないでください。
使用する直前にコンジュゲートを常に希釈してください。
コンジュゲートをベンチに長く放置しないでください。

サンプルの追加

問題は、通常、ウェルの中の緩衝液にサンプルを入れることができず、プレートの側にそれを残すことによって引き起こされる。適切なサンプルの追加に注意してください。

停止試薬

ELISAにおいて停止試薬を加え、さらなる酵素反応を阻止する。
停止は通常、酵素-基質生成物の間の関係が線形相にある時に行われる。
強酸または強塩基のモル濃度は、酵素を迅速に変性させることによって酵素活性を停止させる。いくつかの停止試薬は酵素特異的である。
アジ化ナトリウムはHRPOの強力な阻害剤であり、EDTAは金属イオン補因子のキレート化によってアルカリ性ホスファターゼを阻害する。
停止試薬の添加により生成物の吸収スペクトルが変えられることがあるので、吸収ピークを知る必要がある。