共免疫沈降/Co-IPとは何ですか?

共免疫沈降/ Co-IPは免疫沈降技術から開発され、免疫沈降と特異的抗原 - 抗体反応の基本原理を共有する。Co-IPは、インビトロ生理学的条件において2つのタンパク質が相互作用するか否かを決定するのに役立つ。図表で説明すると 、Co-IPの原理は右側の画像に記載されている通りである。既知のタンパク質(抗原)は餌タンパク質と呼ばれ、それと相互作用するタンパク質はpreyタンパク質と呼ばれる。標準のCo-IPプロトコルはIPのプロトコルと同じであり、実際にはIPに設計されたシステムも全てCo-IPに機能するはずである。その後、細胞は非変性条件下で完全に溶解され、一緒に結合したタンパク質が保持される。したがって、抗Xを使用してCo-IPを介してタンパク質Xを沈殿させる場合、インサイチュのタンパク質Xと相互作用する他のタンパク質を得ることができる。Co-IPは、2つの既知のタンパク質が細胞内で互いに結合するかどうか、または既知のタンパク質と相互作用する新たなタンパク質を見出すために適用される。

長所:

典型的なCo-IPにおいて相互作用するタンパク質は、翻訳後修飾で、構造的に天然である。Co-IPにおいてタンパク質は、非変性条件で相互作用する。これはほとんど生理学的である。

短所:

低親和性のタンパク質相互作用のシグナルは検出されないかもしれない。
特定のタンパク質 - タンパク質相互作用に第3のタンパク質が存在する可能性がある。
適切な抗体を選択するために、標的タンパク質を適切に予測する必要がある。そうしないとCo-IPで肯定的な結果を得られない可能性がある。

共免疫沈降のワークフロー