核タンパク質免疫沈降/IP抗体

免疫沈降は、沈降可能なマトリックスに付着した特異的抗体に結合することによって抗原を単離する技術である。また、ゲル濾過や密度勾配沈降などの他の技術によって分離されたタンパク質分画を分析するためにも使用される。免疫沈降のための抗原の供給源は、非標識細胞または組織、代謝的または内在的に標識された細胞、またはインビトロ翻訳タンパク質であり得る。このユニットでは、種々の手段によって溶解された懸濁細胞または接着細胞を用いた広範囲の免疫沈降技術が記載された。通常、プラズマ導入された細胞または天然細胞は、免疫沈降のための理想的な試料である。

核タンパク質は、細胞核に見出されるタンパク質であり、他のタンパク質、DNAまたはRNAと結合し、細胞のライフサイクルにとって重要な機能を有する。これらのタンパク質の秘密を発見したい場合は、これらのタンパク質を細胞や組織から抽出する必要がある。お客様のニーズに合わせて、核タンパク質を単離するプロトコールは様々である。使用するバッファーは次の通りである。

核溶解バッファー
10mM HepesまたはTris (pH 7.5)
500mM NaCl
1% Triton-X100
10%グリセロール
1mM NaPPi
1ug/mL ペプスタチン
1ug/mLアプロチニン
1ug/mLロイペプチン
1mM NaVO4
1mM NaF
1mM PMSF
50 mLまで水を入れる