免疫沈降/IP-THP-1細胞ライセート

免疫沈降は、沈降可能なマトリックスに付着した特異的抗体に結合することによって抗原を単離する技術である。また、ゲル濾過や密度勾配沈降などの他の技術によって分離されたタンパク質分画を分析するためにも使用される。免疫沈降のための抗原の供給源は、非標識細胞または組織、代謝的または内在的に標識された細胞、またはインビトロ翻訳タンパク質であり得る。このユニットでは、種々の手段によって溶解された懸濁細胞または接着細胞を用いた広範囲の免疫沈降技術が記載された。通常、プラズマ導入された細胞または天然細胞は、免疫沈降のための理想的な試料である。

THP1は、急性単球性白血病患者から単離されたヒト単球細胞株である。通常、これは、タンパク質 - タンパク質相互作用の免疫細胞化学的分析および免疫組織化学において白血病細胞株を試験するために使用される。

これらの細胞は、大きく丸い単細胞形態を示す。

急性単球性白血病を有する1歳のヒト男性患者の末梢血に由来する。次の内容はその特性の一部である。
a. Fc受容体およびC3b受容体を有し、表面および細胞質免疫グロブリンを欠けている。
b. IL-1を産生する。
c.それらはα ナフチルブチレートエステラーゼ染色に対して陽性を示し、リゾチームを生産し、そして貪食性である(ラテックスビーズおよび感作赤血球。
d. それらは精製Tリンパ球の応答をCon Aに回復させることができる。
e.二酸化炭素の増加は食作用を増加させる。また、phorbol 12- myristate 13-acetate(一般にPMAまたはTPAとして知られている)などによってマクロファージ様細胞に分化することができる。

THP-1細胞はまた、精製されたTリンパ球のConcanavlin Aへの応答を回復させることができる。二酸化炭素の増加は食作用を増加させる。DMSOなどによってマクロファージ様細胞に分化することができる。この細胞株の最初の起動時に起こりうる困難のため、成長する細胞の数を増やすことが推奨される。