免疫沈降/IP-RAW264.7細胞ライセート

免疫沈降は、沈降可能なマトリックスに付着した特異的抗体に結合することによって抗原を単離する技術である。また、ゲル濾過や密度勾配沈降などの他の技術によって分離されたタンパク質分画を分析するためにも使用される。免疫沈降のための抗原の供給源は、非標識細胞または組織、代謝的または内在的に標識された細胞、またはインビトロ翻訳タンパク質であり得る。このユニットでは、種々の手段によって溶解された懸濁細胞または接着細胞を用いた広範囲の免疫沈降技術が記載された。通常、プラズマ導入された細胞または天然細胞は、免疫沈降のための理想的な試料である。

RAW264.7 

これらの細胞は、Balb/cマウス由来のマクロファージ様細胞株であり、NO産生、食作用(ビーズ、他)、TLRアゴニストに対する極度の感受性および運動性を含むマクロファージの多くの特性を維持する。遺伝子変異に敏感であるので、フリーザー株は早期継代細胞から作られなければならない。それらが遺伝的にかなり異種であることは利点となり得る。なぜなら、特定のリガンドへの結合を減少させたクローンを単離して増殖させることができるからである。彼らはSRAを発現するが、MARCOは発現しない。死亡率は高く、発現が保証されていないものの、トランスフェクトされている可能性がある。

この細胞株は適切な遺伝子トランスフェクションホストである。ヒツジ赤血球および腫瘍細胞標的の抗体依存性溶解を可能にすることができる。sinobiologialはLPSまたはPPDで2日間処理し、赤血球の溶解を刺激するが、腫瘍細胞標的は溶解しない。